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細胞內的生死游戲：探索細胞焦亡的奧秘
細胞焦亡（pyroptosis）是一種新的程序性細胞死亡方式，其依賴于Gasdermin家族蛋白形成質膜膜孔的、可調控的細胞死亡，經常但并不總因炎癥性Caspase的活化而完成。其形態學特征在電鏡下觀察，可清楚看到在細胞質膜破裂前，焦亡的細胞形成大量小泡，即焦亡小體。之后細胞膜上會形成孔隙，細胞膜破裂，內容物流出。 細胞形態學：根據細胞形態變，可初步鑒定細胞是否發生焦亡。通過光學顯微鏡觀察，可看到胞漿破裂或有大量細胞碎片的存在。 LDH釋放檢測：乳酸脫氫酶（LDH）是存在于幾乎所有細胞內的一種酶，當細胞膜破裂時，LDH能被釋放到培
2023-05-23
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微生物代謝產物氧化三甲胺（TMAO）可以激活抗腫瘤免疫，提高三陰性乳腺癌免疫治療療效
乳腺癌的發病率逐年增高，并成為中國女性發病率最高的惡性腫瘤，是人們常說的“紅顏殺手”。其中，三陰性乳腺癌惡性程度較高，患者生存預后較差，易出現早期復發和轉移，且既往缺乏有效的針對性治療策略，素有最“毒”乳腺癌之稱。近日，復旦大學腫瘤醫院邵志敏教授、江一舟教授課題組攜手復旦大學基礎醫學院教育部/衛健委/醫科院醫學分子病毒學重點實驗室趙超課題組，發現微生物代謝產物氧化三甲胺（TMAO）可以激活抗腫瘤免疫，提高三陰性乳腺癌免疫治療療效。這意味著微生物代謝產物TMAO有望成為三陰性乳腺癌臨床免疫治療的新策略，助推免疫治療。該項重要研究成果已在北京時間3月12日凌晨在國際權威期刊Cell Metabol
2022-12-15
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ELK Biotechnology總結實驗大鼠、小鼠常用的采血方法
常見小鼠采血方法 小鼠是科研實驗中常用的實驗動物，但由于其體積小，血管細，采血難度大，進而影響采血的質量。 ELK簡要總結了常見的小鼠采血方法，僅供參考： 一只成年小鼠的循環血量大約是1.5~2.5ml，大約體重的 6~8%。在對營養狀況良好的小鼠進行采血時，單次采血量最多可以到達循環血量的10%，（例：若20克小鼠，它的總血量約占1.2-1.4毫升，即每次取120ul-140ul血液不會對小鼠有太大的影響）。采血之后應該給予溫熱的等滲溶液補充，可以在2~3個星期內恢復原有的水平。兩周采血量小于血液循環的10%，單周小于7.5%，小鼠血液循環7
2022-09-20
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ELK組織勻漿樣本的收集處理與保存（史上最全）
? 組織勻漿定義：將分化的細胞群用物理機械手段或其它方法，使細胞破碎，細胞內容物釋放，與細胞碎片形成的固液混合形式的濃稠液體。 一、取適量組織塊，用預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.4）沖洗，去除表面殘留的血液與雜質。（很多用戶疑惑，這個適量，到底是多少？ELISA試劑盒檢測中：血清或細胞上清樣本用量100μL/指標（單孔）；組織用量15mg/指標（單孔），差不多干枯綠豆大小。?）具體老鼠各器官大小可見下圖。 二、將組織塊稱重，再剪切成盡可能的小碎塊，以便充分勻漿； 三、可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：
2022-09-20
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ELISA實驗中做好標曲為什么這么重要
酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作，可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質/多肽/抗體這一基本問題，是科研中比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心，就是標準曲線。沒有它，我們的實驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它，我們可以深入研究生物反應的細節。那么，是什么使得標準曲線如此強大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。 簡單地說，標準品就是一系列已知目標蛋白數量的陽性對照。例如，如果對人類IgG進行ELISA檢測，標準曲線將包含逐漸減少的已知量的人類IgG，它會讓你立刻得出一系列的結論。 1.我的EL
2022-08-01
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NF-κB經典信號通路
NF-kB(核因子激活的B細胞的k-輕槌增強)在細胞因子誘導的基因表達中起關鍵性的調控作用，它調控的基因編碼：急性期反應蛋白、細胞因子、細胞粘附分子、免疫調節分子、病毒癌基因、生長因子、轉錄和生長調控因子等。通過調控多種基因的表達，NF-kB參與免疫反應、炎癥反應、細胞凋亡、腫瘤發生等多種生物進程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)組成,它們在N端都具有Rel同源結構域，其中cReI, ReIA (p65)和ReIB存在轉錄激活區(TAD)，可正向調節基因表達；p52和p50分別由前體蛋白p100、
2022-07-21
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PCR、qPCR、RT-PCR、Real-time PCR區別淺析
PCR技術介紹： 聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）是在體外酶促擴增特定DNA片段的技術，由美國Kary Mullis及其同事于1985年發明。熱穩定性Taq DNA聚合酶的應用和自動化裝置的發明與完善，使PCR技術進入實用階段。該技術的發明和廣泛應用，大大推動了分子生物學各相關學科的發展，發明者也因此獲得了1993年的諾貝爾化學獎。 隨著PCR技術的成熟，派生了不少相關技術。這類技術具有敏感、特異、快速和簡單等優勢，在微生物檢驗中的應用越來越廣，不少國家將其納入檢驗的標準方法；
2022-07-13
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PD-1人源化小鼠模型介紹
品系背景∶C57BL/6N 品系構建策略∶ 在小鼠PD-1基因位點敲入人源PD-1胞外域序列，保留小鼠跨膜域和胞內域，構建嵌合型PD-1人源化小鼠模型。 品系說明∶ hPD-1在小鼠體內具有正常的生理表達和調節模式。 PD-1胞外域人源化，利于hPD-1靶向藥物的識別。 保留小鼠PD-1胞內域，保證正常的胞內信號轉導。 小鼠靶基因不表達，避免交叉反應。 小鼠的免疫系統功能健全。 研究應用∶ 本模型可用于評估hPD-1靶向藥物在免疫健全小鼠體內的有效性及安全性∶ 與人源化腫瘤細胞系聯用 例如∶與MC38-hPD-L1腫瘤細胞
2022-05-23
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